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体外诊断ppt模板

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  • 素材类别:课件PPT
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  • 关键提要:体外诊断
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这是体外诊断ppt模板,关于体外诊断试剂,包括了体外诊断试剂的概念,体外诊断试剂的分类先容,化学发光产品行业情况,Q&A等内容。

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体外诊断ppt模板

PPT内容

体外诊断试剂产品概况
医学二部  李子颖
April 2013
主要内容
第一部分
                 体外诊断试剂的概念
体外诊断试剂的概念、特点、用途
体外诊断试剂:是指采用免疫学、微生物学、分子生物学等原理或方法制备的、在体外通过检测取自机体的某一部分(如血清、体液等)用于对人类疾病的诊断、检测及流行病学调查等的诊断试剂。
特点:体外诊断技术具有“便捷、快速、准确、无痛”等特点,是目前诊断、检测疾病的主要诊断技术。
应用领域:体外诊断试剂目前主要应用于各类医疗机构,而未来家庭用诊断试剂将会得到蓬勃发展。
体外诊断试剂的分类
我国体外诊断试剂的产品结构
第二部分
       分类产品先容(原理、应用)
体外诊断试剂-先容内容
免疫诊断
放射免疫分析
酶联免疫分析
化学发光免疫分析
胶体金免疫层析试纸
蛋白质芯片
1 临床生化试剂
临床生化试剂主要有测定酶类、糖类、脂类、蛋白和非蛋白氮类、无机元素类、肝功能、临床化学控制血清等几大类产品,主是用于配合手工、半自动和一般全自动生化分析仪等仪器检测。
作为医疗检测的基本组成部分,凭借其花费低、速度快的优势,临床生化试剂将保持较大份额,并在相当长一段九州ju111net手机登录内很难被取代。
1 临床生化试剂
1 临床生化试剂
全自动生化仪
分析原理:分光光度测定法和电势测定法
分析类型:终点法、速率法、固定九州ju111net手机登录法和间接离子选择电极法(ISE)
分析方法:比色法、比浊法、乳胶凝集法、均项酶免疫分析法、间接离子选择电极法(ISE)
1 临床生化试剂
全自动生化仪的检查项目
肝功:谷丙转氨酶(ALT/GPT)、谷草转氨酶(AST/GOT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(T.BIL)、直接胆红素(D.BIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)
肾功:尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、二氧化碳结合力(CO2)、尿酸(UA)
血脂:总胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)
血糖:葡萄糖(GLU)
心肌酶:肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、谷氨酰转肽酶(r-GT)
离子:钙(Ca)、磷(P)、镁(Mg)、钾(K)、钠(Na)、氯(CL)等
mg-μg(10-3 -10-6 g)
2 免疫诊断试剂
免疫诊断试剂是利用抗原与抗体互相结合的特异性反应来进行定性或定量的诊断,无论是技术还是市场,此类试剂在目前所有诊断试剂产品中的发展都是最快的。
免疫诊断试剂在诊断试剂盒中品种最多,根据诊断类别,可分为传染性疾病、内分泌、肿瘤、药物检测、血型鉴定等。
免疫诊断-放射免疫分析
1959年由Yalow和Berson首先用于糖尿病
  患者血浆胰岛素含量的测定,从而开创了
  放射免疫分析。
基本原理
(1)竞争结合分析:Ag + Ab  AgAb
                      *Ag + Ab  *AgAb
(2)IRMA(免疫放射分析):
常用标记核素:
(1)125I: γ 射线,半衰期 60 天
(2)3H: β 射线,半衰期 12.3 年
测量仪器
(1)γ 计数仪
(2)β 液闪仪
2 免疫诊断试剂
2.1 酶免疫分析
1966年,Nakane和Avrameas等分别报道用酶代替荧光素标记抗体,建立了酶标抗体技术(enzyme-labelled  antibodytechnique),用于生物组织中抗原的定位和鉴定。
1971年,Engvall ,Van Weemen 等报道了酶联免疫吸附试验,从而建立了酶标抗体的定量检测技术。
目前,免疫酶标记技术已成为免疫诊断、检测和分子生物学研究中应用最广泛的免疫学方法之一。
2.1 酶免疫分析
1. 均相酶免疫测定法(EIA):
      主要用于测小分子抗原。酶标抗原与待测抗原竞争结合定量抗体
2. 酶联免疫吸附试验(ELISA):
      为固相、非均相酶免疫测定法,目前应用最广泛的定性标记免疫分析技术,也可用于定量分析。1971 年 van Weeman(荷)等发明
3. 生物素-亲和素系统免疫检测法
      生物素标记一抗或二抗,酶标记亲和素
2.1 酶联免疫吸附分析(ELISA)
ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品,参考标准品;
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液;
(7)酶反应终止液;
2.1 酶联免疫吸附分析(ELISA)
包被载体-96孔板
2.1 酶联免疫分析-仪器
2.1 酶联免疫吸附分析(ELISA)-双抗夹心
2.1 酶联免疫吸附分析-酶标抗原竞争法
2.2 化学发光免疫分析
化学发光免疫分析
(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)
是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者,是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛,已占各种免疫分析的首位。
2.2 化学发光免疫分析
化学发光是一种特异的化学反应,有机分子吸取化学能后发生能级跃迁,产生一种高能级的电子激发态不稳定的中间体,当其返回到基态而发出光子,即为化学发光。将化学发光与抗原抗体相结合而形成的免疫分析技术,即为化学发光免疫分析。
化学发光的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光九州ju111net手机登录很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光九州ju111net手机登录从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须马上测量,必须配以全自动化的加样及测量仪。测量辉光型的样品可以使用通用型仪器,也可以配全自动化仪器。
2.2 化学发光免疫分析
化学发光免疫分析的类型
1、直接化学发光免疫分析
1. 吖啶酯
2、化学发光酶免疫分析
1.鲁米诺及其衍生物
2.AMPPD
3、电化学发光免疫分析
1. 三联吡啶钌
2.2 直接化学发光机理-夹心法
2.2 HRP标记化学发光免疫分析示意图
2.2 电化学发光免疫分析示意图
2.2 化学发光免疫分析-仪器
2.3 胶体金免疫层析试纸条
2.3 胶体金免疫层析试纸条
层析法技术优势:简单\现场\快速
2.3 胶体金免疫层析试纸条-与常规诊断相比
2.3 胶体金免疫层析试纸条-试纸条的组成
2.3 胶体金免疫层析试纸条-检测原理
基本原理是将已知的特异性抗原或抗体固定于硝酸纤维素膜上某一区带作为检测带
在样品区滴加样品后,借助毛细作用,样品泳动至玻璃纤维膜,金标复合物溶解,并与样品进行抗原抗体反应,形成复合物,继续泳动至硝酸纤维素膜的检测区,带有金标记的复合物被检测区抗原或抗体捕获,呈现红色条带。如样品中没有待测抗原或抗体,则不发生结合,即不显色
在硝酸纤维素膜检测区附近一般再固定上针对金标结合物相应的抗原或抗体作为质控带,无论样品中有无待测物,质控线都应显示,如无,则检测失败。整个过程一般在15分钟内完成,操作简单、快速,且不需任何仪器。
2.3 胶体金免疫层析法-举例
2.4 蛋白芯片
2.4 蛋白芯片
蛋白质芯片是指固定于支撑介质上的蛋白质构成的微阵列。
2.4 蛋白芯片-检测原理
蛋白芯片技术的基本原理: 将各种蛋白质有序地固定于滴定板、滤膜和载玻片等各种载体上,然后,用标记了特定荧光的蛋白质或其他成分与芯片作用,经漂将未能与芯片上的蛋白质互补结合的成分洗去,再利用荧光扫描仪或激光共聚焦扫描技术,测定芯片上各点的荧光强度,通过荧光强度分析蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系,由此达到测定各种蛋白质功能的目的。 固定在芯片上的蛋白可以是:抗原、抗体、小肽、受体和配体、蛋白质-DNA和蛋白质-RNA复合物等。
2.4 蛋白芯片—优势
蛋白芯片较之传统分析方法主要有以下优点
1、蛋白芯片上可以实现成千上万个蛋白质样品的高通 量平行分析, 一次实验可提供大量数据----高通量 2、有高的信噪比----高准确性、高灵敏度 3、所需样品量极少----微量化 4、在整个基因组和蛋白质组水平将DNA序列信息与蛋白质产物直接联系起来 5、快速、微型化和自动化。
2.4 蛋白芯片的检测
2.4 蛋白芯片的应用和问题
3 核酸检测
核酸检测(nucleic acid testing,NAT)是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称,可在尚未检测到抗原或抗体前,先检测到病毒核酸。
其基本步骤包括核酸提取、扩增和检测。也就是常说的基因检测,是通过血液、其他体液或细胞对DNA进行检测的技术,可以诊断疾病,也可以用于疾病风险的预测。
3 核酸检测的特点
显著缩短窗口期:HIV窗口期缩短45%,HCV缩短89%,HBV缩短50%。
提 高 灵 敏 度:理论上扩增体系中单拷贝模板也能被检测出。
特  异  性  好:使用荧光探针技术的PCR检测,几乎没有方法学的假阳性。
直接揭示病原体的存在
对操编辑及检测环境的要求较高
检测成本相对较高
3 核酸检测的一般流程
3 核酸检测在临床诊断中的应用
3 核酸检测的仪器
第三部分
           化学发光产品行业情况
全自动化学发光
主要的国外产品有
罗氏(电化学发光)
雅培(吖啶酯)
贝克曼(AMPPB)
西门子(吖啶酯)
索灵(异鲁米诺)
东曹(酶促)
罗氏-cobas e601
雅培-ABBOTTi2000sr
贝克曼-UniCel DxI800
新产业-MAGLUMI2000
测试速度180个/小时
17分钟快速获得第一个结果,以后每分钟出3个结果;
真正的24小时待机,标本随到随测;
一次可装载25个试剂位,144个样本,可连续装载;
我部代理-ZT480
测试速度:480个测试/小时
样本量:一次性可装载120个样本并可随时添加
反应杯:一次性可装载360个反应杯并可随时添加
试剂位:可同时放置40个试剂位
Thank you
Q&A
 

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